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过磷酸钙施入土壤后发生哪些变化？

过磷酸钙施入土壤后，进行着各种化学的、物理化学的和生物学的转化。各地实践证明，过磷酸钙的利用率较低，一般只有10%～25%，其主要原因是生成溶解度低，有效性较差的稳定性磷化合物。

当过磷酸钙施入土壤后，水分从土壤周围向施肥点汇集，使磷酸一钙溶解和水解，形成一种磷酸一钙、磷酸和含水磷酸二钙的饱和溶液，比原来土壤溶液中磷酸离子的浓度高，与周围溶液形成了浓度差，磷酸就不断地向四周土壤扩散。在扩散过程中，磷酸逐步与土壤中多种离子起反应，同时，磷酸一钙溶解后，会引起土壤溶液pH反应急剧下降，能把土壤中的铁、铝、钙、镁等成分溶解出来，与磷酸发生化学作用，形成不同溶解度的磷酸盐沉淀。

过磷酸钙与有机肥料混合施用过磷酸钙与有机肥料混合施用为什么会提高磷的有效性呢？这是由于过磷酸钙与有机肥料混合时，可以减少过磷酸钙与土壤直接接触而被固定的机会。被有机肥料包围的过磷酸钙颗粒，在土壤溶液中慢慢释放出磷素供作物利用。

有机肥料与过磷酸钙混合施用还能抑制过磷酸钙中的磷酸转化为溶解性低的磷酸盐形态。有机肥料中的一些有机阴离子如柠檬酸、草酸、丙二酸、苹果酸和酒石酸等有机酸能使钙沉淀，从而减少磷酸转化为不溶性的钙磷酸盐，提高磷肥的有效性。

提高磷酸钙转染法效率的共通步骤，目的都是为了避免产生会被细胞内吞、加工失效的大颗粒沉淀。

提高转染效率的操作有以下这些：

1、将小分子DNA整合在高分子质量基因组DNA上，以大分子作为运载体，能提高转染效率。

2、测试缓冲液适合的ph，可制备几批pH范围为6.90～7.15的HEPES盐缓冲液，分别测试缓冲效率，找到适pH值。

3、使用转染促进剂，如甘油、氯喹、其他可购买的转染促进剂。因为这些试剂对细胞有一定毒性，因此，应针对每种细胞系通过实验确定转染促进剂处理的佳时机、时长和强度。

除了这些共通的步骤，不同厂家还会对混匀DNA和磷酸钙的速度有要求。有些方法要求只能轻轻搅动，有些建议用移液器温和吹吸混匀，有些则提倡应缓慢混合。

因此，在使用磷酸钙转染时，应针对不同试剂和细胞系，耐心调整实验参数，才是获得高转染效率的关键。